|
|
гнездовая полимеразная цепная реакция
гнездовая ПЦР
[греч. polymeres — состоящий из многих частей, многообразный; лат. re- — приставка, обозначающая повторность действия, и actio — действие] — вариант полимеразной цепной реакции (см. Полимеразная цепная реакция, ПЦР) с использованием двух пар праймеров (внешних и внутренних), одна из которых способна амплифицировать внутренний участок ампликона, полученного после первого раунда амплификации с внешней парой праймеров. Существует несколько вариантов применения Г.п.ц.р. в лабораторной диагностике. Напр., в одном из вариантов проводится амплификация (15—30 циклов) с внешней парой праймеров, при этом амплифицируется основной фрагмент ДНК. Далее часть содержимого переносится в новую пробирку, содержащую реакционную смесь, в состав которой входит пара праймеров, узнающая последовательности, лежащие внутри основного ампликона. Второй раунд амплификации (реамплификации) также составляет 15—30 циклов. В другом варианте температура отжига внутренней пары праймеров подбирается с таким расчетом, чтобы при проведении первого раунда амплификации они не участвовали в реакции. Обычно температура отжига праймеров в этом варианте Г.п.ц.р. подбирается на 10—15 °С ниже, чем для внешней пары праймеров; программа амплификации в этом случае состоит из двух программных блоков. После проведения первого программного блока амплификации температура отжига праймеров для второго раунда задается на 10 градусов ниже, что обеспечивает эффективное участие внутренней пары праймеров во втором раунде амплификации. По сравнению со стандартной полимеразной цепной реакцией Г.п.ц.р. имеет более высокую чувствительность и специфичность.
[В. З.Тарантул. Толковый биотехнологический словарь. Русско-английский] |
|
EN |
|
|
FR |
|
|
Синонимы
EN
- nested polymerase chain reaction
- nested PCR
|
